染色體熒光原位雜交免費咨詢「貝科新肽」[貝科新肽]內(nèi)容:FISH是原位雜交技術(shù)大家族中的一員,因其所用探針被熒光物質(zhì)標記(間接或直接)而得名,該方法在80年代末 被發(fā)明,現(xiàn)已從實驗室逐步進入臨床診斷領(lǐng)域?;驹硎菬晒鈽擞浀暮怂崽结樤谧冃院笈c已變性的靶核酸在退火 溫度下復性;通過熒光顯微鏡觀察熒光信號可在不改變被分析對象(即維持其原位)的前提下對靶核酸進行分析。DNA熒光標記探針是其中常用的一類核酸探針。利用此探針可對組織、細胞或染色體中的DNA進行染色體及基因水平 的分析。熒光標記探針不對環(huán)境構(gòu)成污染,靈敏度能得到保障,可進行多色觀察分析,因而可同時使用多個探針,縮 短因單個探針分開使用導致的周期過程和技術(shù)障礙。

基因組原位雜交技術(shù)基因組原位雜交(Genome in situ hybridization,GISH)技術(shù)是20世紀80年代末發(fā)展起來的一種原位雜交技術(shù)。它主要是利用物種之間DNA同源性的差異,用另一物種的基因組DNA以適當?shù)臐舛茸鞣庾?,在靶染色體上進行原位雜交。GISH技術(shù)初應(yīng)用于動物方面的研究(Pinkel et al.,1986),在植物上早應(yīng)用于小麥和栽培種的鑒定(余舜武等 2001;王文奎等 2000)。

原位雜交技術(shù)是在一定的溫度和離子濃度下,使具有特異序列的單鏈探針通過堿基互補規(guī)則與組織細胞內(nèi)待測的核酸復性結(jié)合而使得組織細胞中的特異性核酸得到定位,并通過探針上所標記的檢測系統(tǒng)將其在核酸的原有位置上顯示出來。經(jīng)特定標記的核苷酸鏈為探針,可與組織切片、細胞或染色體標本中的待檢DNA片段或mRNA進行雜交,然后顯示標記物,從而分析待檢核酸的分布和含量。利用此項技術(shù)可研究各種基因在染色體上的定位,編碼某種蛋白質(zhì)的mRNA在胞質(zhì)中的表達。

植物原位雜交在遺傳育種方面的應(yīng)用主要包括:
異源染色質(zhì)及多種染色體畸變檢測:通過遠緣雜交把有用遺傳物質(zhì)基因的異源染色質(zhì)漸滲到植物中。如帶有幾種抗病基因的黑麥1R染色體已被整合到許多高產(chǎn)的小麥品種中。原位雜交技術(shù)則是鑒定外源染色體(質(zhì))的有效手段。
基因組印記研究:基因組印記是指一個基因的兩條染色體上的DNA序列存在差異。通過植物原位雜交技術(shù),可以檢測到基因組印記的存在和分布,從而幫助確定基因組的進化、遺傳和功能特征。

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