把濾膜放在紙巾上于室溫晾干后，把濾膜（編號面朝上）放在一張保鮮膜上，并在保鮮膜上作幾個不對稱的標(biāo)記，以使濾膜與性自顯影片位置對應(yīng)。
用第二張保鮮膜蓋住濾膜。加光片并加上增感屏于-70℃曝光12-16小時。
底片顯影后，在底片上貼一張透明硬紙片。在紙上標(biāo)記陽性雜交信號的位置，同時在不對稱分布點的位置上作出標(biāo)記?？蓮牡灼先∠峦该骷?，通過對比紙上的點與瓊脂上的點來鑒定陽性菌落。
原位雜交技術(shù)（in situhybridization）是以標(biāo)記的核酸分子為探針，在組織細(xì)胞原位檢測特異核酸分子的技術(shù)。使含有特異序列、經(jīng)過標(biāo)記的核酸單鏈即探針，在適宜條件下與組織細(xì)胞中的互補(bǔ)核酸單鏈即靶核酸發(fā)生雜交，再以自顯影或細(xì)胞化學(xué)方法對標(biāo)記探針進(jìn)行探測，從而在細(xì)胞原位顯示特異的DNA或RNA分子。
可以檢測cRNA、miRNA、LnRNA、DNA?？梢愿鞣N種屬的標(biāo)本，包括哺乳動物、爬行動物、菌、植物標(biāo)本。也可以檢測組織芯片。
在原位雜交過程中，需要使用標(biāo)記的核酸探針，通常是在性核素或非性物質(zhì)中標(biāo)記的。這些探針可以通過不同的方式制備，例如從已知序列的DNA或RNA制備，或者通過使用生物信息學(xué)方法設(shè)計和合成新的探針。
在進(jìn)行原位雜交時，細(xì)胞或組織需要固定在適當(dāng)?shù)闹С治锷?，例如載玻片。然后，探針與細(xì)胞或組織中的DNA或RNA進(jìn)行雜交，通常是在加熱條件下進(jìn)行的。接下來，通過洗滌和顯影步驟去除未結(jié)合的探針和信號增強(qiáng)劑，后用顯微鏡觀察雜交信號的位置。
以上信息由專業(yè)從事染色體原位雜交的貝科新肽于2025/4/8 16:08:50發(fā)布
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