以菌落原位雜交為例：對分散在若干個瓊脂平板上的少數(shù)菌落（100-200）進行篩選時，可采用該方法。將這些菌落歸并到一個瓊脂主平板以及已置于第二個瓊脂平板表面的一張纖維素濾膜上。經(jīng)培養(yǎng)一段時間后，對菌落進行原位裂解。主平板應(yīng)貯存于4℃直至得到篩選結(jié)果。
將少數(shù)菌落轉(zhuǎn)移到纖維素濾膜上
（1） 在含有選擇性的瓊脂平板上放一張纖維素濾膜。
（2） 用無菌牙簽將各個菌落先轉(zhuǎn)移至濾膜上，再轉(zhuǎn)移至含有選擇性但未放濾膜的瓊脂主平板上。應(yīng)按一定的格子進行劃線接種（或打點）。每菌落應(yīng)分別劃線于兩個平板的相同位置上。后，在濾膜和主平板上同時劃一個含有非重組質(zhì)粒的菌落。
（3） 倒置平板，于37℃培養(yǎng)至劃線的細菌菌落生長到0.5-1.0mm的寬度。
（4） 用已裝防水黑色繪圖墨水的針頭穿透濾膜直至瓊脂，在3個以上的不對稱位置作標記。在主平板大致相同的位置上也作上標記。
（5） 用Parafilm膜封好主平板，倒置貯放于4℃，直至獲得雜交反應(yīng)的結(jié)果。
（6） 裂解細菌，按本段下面所述方法，使釋放的DNA結(jié)合于纖維素濾膜。
原位雜交技術(shù)還在以下生物領(lǐng)域有應(yīng)用：
生態(tài)學(xué)和環(huán)境科學(xué)：在生態(tài)學(xué)和環(huán)境科學(xué)領(lǐng)域，原位雜交技術(shù)可以用于研究生物與環(huán)境之間的相互作用。例如，通過標記特定基因的探針，可以檢測環(huán)境中微生物種群的分布和變化，進而研究其對環(huán)境的影響和作用。
進化生物學(xué)：在進化生物學(xué)領(lǐng)域，原位雜交技術(shù)可以用于研究物種之間的遺傳差異和進化關(guān)系。例如，通過比較不同物種之間基因序列的差異，可以揭示物種之間的親緣關(guān)系和進化歷程。
熒光原位雜交（FISH）技術(shù)具有以下優(yōu)點：
高特異性：熒光探針的合成是定向的，保證了雜交過程的特異性，可以有效地降低非特異性雜交和背景干擾。
高靈敏度：熒光信號的檢測比性信號的檢測更靈敏，可以檢測出低拷貝數(shù)的DNA序列，甚至可以檢測單個基因序列。
快速簡便：FISH技術(shù)操作簡便，雜交過程可以在數(shù)小時或數(shù)天內(nèi)完成，而且不需要過于復(fù)雜的設(shè)備，便于在實驗室開展。
以上信息由專業(yè)從事原位雜交檢測的貝科新肽于2025/4/4 4:08:22發(fā)布
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