原位雜交:
原位雜交是指用特定探針定位、檢測(cè)DNA、RNA的一種有效的實(shí)驗(yàn)方法,通過把特點(diǎn)序列客隆到特殊載體上,通過轉(zhuǎn)錄酶反轉(zhuǎn)一條天然的RNA探針,將探針和切片樣品進(jìn)行雜交,通過一系列顯色方法,來確定RNA或者DNA表達(dá)區(qū)域;本中心原位雜交探針采用的是第高辛和生物素標(biāo)記,靈敏度和同位素相當(dāng)。 我們采用roche標(biāo)記及顯色試劑盒,GISH/ISH/FISH按照探針進(jìn)行收費(fèi),每個(gè)試劑盒每條探針可以雜交60-80張玻片,收費(fèi)為1萬5千元,GISH雜交因需要加抗淬滅劑每條探針收費(fèi)為1萬9千元。量大優(yōu)惠!
原位雜交第二天
1.
1)將探針回收,放于-20C保存(通常探針可重復(fù)使用十次左右)。
2)加入50%甲酰胺/2XSSCT溶液1毫升,60℃,放置30分鐘,重復(fù)一次。
3)置換2XSSCT1ml,60℃,放置15分鐘。
4)置換0.2XSSCT1ml,60℃,放置30分鐘,重復(fù)一次。
2.
1)用MABT洗兩次,每次五分鐘,放在搖床輕輕搖動(dòng)。
2)室溫下加1ml 1:2:7溶液,時(shí)間為一小時(shí)。
3)按1:3000的比例在1:2:7溶液中加入酶連,4C 冰箱過夜。
植物組織原位雜交是一種重要的分子生物學(xué)技術(shù),它可以用來研究植物基因的表達(dá)和調(diào)控。該技術(shù)利用DNA探針與目標(biāo)組織中的RNA或DNA結(jié)合,從而確定目標(biāo)基因的表達(dá)模式和位置。本文將介紹植物組織原位雜交的原理、步驟和應(yīng)用。
原理
植物組織原位雜交的原理是利用DNA探針與目標(biāo)組織中的RNA或DNA結(jié)合,從而確定目標(biāo)基因的表達(dá)模式和位置。DNA探針是一段已知序列的DNA分子,可以與目標(biāo)RNA或DNA的互補(bǔ)序列結(jié)合。在組織原位雜交中,DNA探針通常標(biāo)記有熒光染料或性同位素,以便于檢測(cè)。
以上信息由專業(yè)從事GISH的貝科新肽于2025/4/12 15:24:48發(fā)布
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