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湖北動(dòng)物組織原位雜交承諾守信「貝科新肽」

發(fā)布者:貝科新肽 發(fā)布時(shí)間:2025-10-09 09:52:47

湖北動(dòng)物組織原位雜交承諾守信「貝科新肽」[貝科新肽]內(nèi)容:

原位雜交技術(shù)的原理是什么?有何用途

原位雜交技術(shù)的原理是利用核酸分子單鏈之間有互補(bǔ)的堿基序列,將有性或非性的外源核酸(即探針)與組織、細(xì)胞或染色體上待測(cè)DNA或RNA互補(bǔ)配對(duì),結(jié)合成專(zhuān)一的核酸雜交分子,經(jīng)一定的檢測(cè)手段將待測(cè)核酸在組織、細(xì)胞或染色體上的位置顯示出來(lái)。為顯示特定的核酸序列要具備3個(gè)重要條件:組織、細(xì)胞或染色體的固定、具有能與特定片段互補(bǔ)的核苷酸序列(即探針)、有與探針結(jié)合的標(biāo)記物(曾呈奎等2000)。

和其它實(shí)驗(yàn)方法一樣,必須同時(shí)設(shè)對(duì)照試驗(yàn)以證明其實(shí)驗(yàn)結(jié)果特異性。對(duì)照試驗(yàn)的設(shè)置須根據(jù)核酸探針和靶核苷酸的種類(lèi)和現(xiàn)有的可能條件去選定。ISHH的優(yōu)點(diǎn)是它的高度特異性,它可測(cè)定組織、培養(yǎng)的單個(gè)細(xì)胞或細(xì)胞提取物中的核苷酸含量。應(yīng)用高敏感度的性標(biāo)記cRNA探針在理想的ISHH的實(shí)驗(yàn)條件下檢測(cè)mRNA,其敏感度可達(dá)到20個(gè)mRNA拷貝/每個(gè)細(xì)胞。由于雙鏈DNA的穩(wěn)定性,在用ISHH定位DNA時(shí)很少發(fā)生丟失,降解,其敏感性高到能夠顯示在染色體鋪片上,有時(shí)甚至在組織切片上的單個(gè)基因拷貝。正因?yàn)槿绱?,?duì)ISHH結(jié)果的解釋?xiě)?yīng)持慎重態(tài)度,特別是前人未報(bào)告過(guò)的新發(fā)現(xiàn)。

怎樣保證原位雜交實(shí)驗(yàn)操作時(shí)的溫度?

建議儀器操作,人工操作的話要注意:

(1)對(duì)熒光原位雜交操作過(guò)程中可能使用的一些儀器進(jìn)行溫控檢查,不符合要求的進(jìn)行更換。

(2)盡可能地保持環(huán)境溫度在20度以上。

(3)針對(duì)需要預(yù)熱以達(dá)到要求溫度的試劑,在使用前必須使用溫度計(jì)對(duì)其進(jìn)行測(cè)溫。

(4)同時(shí)檢測(cè)的樣本不超過(guò)4塊,操作一定要迅速,實(shí)驗(yàn)人員要注意一些小部件的溫度,尤其是在冬季。

原位雜交是一種非常重要的技術(shù),因?yàn)樗梢栽诩?xì)胞或組織的自然環(huán)境中研究基因表達(dá)和調(diào)控。它可以幫助科學(xué)家們了解基因在特定組織或細(xì)胞類(lèi)型中的作用和功能,以及在疾病發(fā)生和發(fā)展過(guò)程中的變化。此外,這項(xiàng)技術(shù)還可以用于檢測(cè)基因變異和染色體異常,以及監(jiān)測(cè)細(xì)胞生長(zhǎng)和凋亡。

雖然原位雜交是一項(xiàng)非常有用的技術(shù),但它也有一些限制。首先,探針的特異性可能受到干擾,導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)果。其次,探針的數(shù)量和位置可能受到細(xì)胞或組織中其他成分的影響。此外,這項(xiàng)技術(shù)的操作比較繁瑣,需要專(zhuān)門(mén)的技術(shù)和設(shè)備,而且需要大量的實(shí)驗(yàn)和對(duì)照才能獲得可靠的結(jié)果。

以上信息由專(zhuān)業(yè)從事動(dòng)物組織原位雜交的貝科新肽于2025/4/5 9:52:47發(fā)布

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